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細胞培養(yǎng):細胞生長緩慢怎么辦?點擊次數(shù):4579 更新時間:2017-06-16

在細胞培養(yǎng)的實驗中,難免會遇到這樣那樣的問題,比如細胞不貼壁、HP值變化迅速、細胞凋亡、等等。

細胞生長緩慢

1.培養(yǎng)基或血清改變:比較不同培養(yǎng)基配方中葡萄糖、氨基酸及其他成分有無差異;通過生長實驗比較新老批次血清有無差異;增大細胞初始接種密度;使細胞逐步適應(yīng)新的培養(yǎng)基。

2.必需生長促進成分(如L-谷氨酰胺或生長因子)耗竭、缺乏或分解:去除原培養(yǎng)基,加入新鮮培養(yǎng)基;向培養(yǎng)基中添加生長促進成分(如L-谷氨酰胺)。

3.輕度細菌或真菌污染:在不添加抗生素的條件下進行培養(yǎng),如細胞被污染,滅菌處理后丟棄。

4.時間存儲不當:血清應(yīng)于-5℃至-20℃下儲存;培養(yǎng)基應(yīng)于2℃~8℃下避光儲存;盡量減少血清和培養(yǎng)基見光時間。

5.細胞初始接種密度低:增大活細胞接種密度。

6.細胞衰老、老化:將老化細胞丟棄,取用代數(shù)較少的細胞。

7.支原體污染:隔離細胞,檢測是否感染支原體;清洗通風廚和培養(yǎng)箱,如細胞被污染,滅菌處理后丟棄。

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